1. 縮寫詞簡介：

• IND：（Investigational New Drug），一般是指尚未經過上市審批，正在進行各階段臨床試驗的新藥。IND申請，目的在于向藥監部門提供報告證明藥物具備開展臨床試驗的安全性和合理性，獲準后方可開展臨床試驗。、

• Pre-IND：依據《國家藥品監督管理局關于調整藥物臨床試驗審評審批程序的公告》：申請人在提出新藥首次藥物臨床試驗申請之前，應向藥審中心提出溝通交流會議申請。其中，在申請人遞交IND申請前，可自愿進行一次重要的會議，即Pre-IND會議。
• Pre-NDA：Pre-NDA會議（新藥上市申請前會議）是藥品上市許可申請前的重要溝通交流會議，申請人在進行Pre-NDA會議溝通交流時，需明確會議目的、提出具體的溝通交流問題、充分準備資料和研究數據，以解決NDA申報前存在的關鍵技術問題。

• NDA：NDA（New Drug Application）是指新藥經過臨床試驗后，申報注冊上市的階段；主要目的是確保上市藥品安全有效和質量可控，經過NDA，藥品獲得批準后才能上市銷售。

• CMC：化學、制造和控制（Chemistry, Manufacturing, and Controls）

• GLP：（Good laboratory practice of drug），即{藥品非臨床研究質量管理規范}。僅針對藥物實驗室，GLP認證是指國家食品藥品監督管理局對藥物非臨床安全性評價研究機構的組織管理體系、人員、實驗設施、儀器設備、實驗項目的運行與管理等進行檢查，并對其是否符合GLP作出評定。GLP認證分為申請與受理、資料審查與現場檢查以及審核與公告三大環節。 

• CTD：2001年4月4日，歐盟頒布第一部完整的人用藥品臨床試驗相關法規Clinical Trials Directive 2001/20/EC（簡稱CTD）

• CTR：2014年4月16日，人用藥品臨床試驗法規Clinical Trials Regulation (EU) No 536/2014（簡稱CTR），并取代Directive 2001/20/EC用于臨床試驗監管。

• PD: pharmacodynamics研究藥物對機體的作用、作用原理及作用規律

• PK: pharmacokinetics主要研究體內藥物濃度隨時間變化的規律，涉及ADME等方面，即藥物在體內的吸收（Absorption）、分布（Distribution）、代謝（Metabolism）、和排泄（Excretion）過程。

• SP: 安全藥理學（Safety Pharmacology）主要是研究藥物在治療范圍內或治療范圍以上的劑量時,潛在的不期望出現的對生理功能的不良影響,即觀察藥物對中樞神經系統、心血管系統和呼吸系統的影響。

• MTD: Maximal tolerance dose最大耐受量：指動物能夠耐受的而不引起動物死亡的最高劑量

• DRF: dose range finding。為了增加重復給藥毒性試驗的成功率，一般會在開展正式GLP條件下的重復給藥毒性試驗（一般4周28天）之前進行預實驗，也叫劑量探索試驗（dose range finding，DRF）。常見的DRF一般是7天或14天。

• hERG: human Ether-a-go-go Related Gene 人類ether-a-go-go相關基因（human ether-a-go-go related gene）編碼一種內向整流電壓門控型的鉀離子通道（簡稱hERG）

• ADME: Absorption, Distribution, Metabolism，Excretion

• DDI：藥物相互作用（Drug-drug interaction，DDI）指的是同時使用多種藥物時，藥物之間產生的藥代動力學和藥效動力學改變。DDI 整體研究一般包括體外試驗和臨床試驗兩部分。

• TK：臨床前藥物安全性評價研究中的毒代動力學(Toxicokinetics，TK)研究受試物在毒性試驗中不同劑量水平下的全身暴露程度和持續時間，預測受試物在人體暴露時的潛在風險，

• FIH：first in human人體首次劑量，FIH劑量的合理預估對于藥物的臨床開發極為重要，起始劑量的選擇須足夠安全，同時又要避免過低導致過度的劑量爬坡，此外對于危重疾病倫理上盡量保證病人處于有效劑量范圍。目前，FIH劑量估計的方法大多基于動物種屬的NOAEL（no observable adverse effect levels）劑量進行估計，該法以各種屬的等效劑量為外推基礎，較籠統且保守。基于PK的估計方法機制上更合理，從藥物暴露量水平來進行等效估計，前提是需要準確的預測人體PK。

2. 新藥研發流程簡介：

a. “靶點選擇——Hit to Lead優化——候選化合物”

• 早期藥學研究

• 早期藥代動力學研究

• 細胞活性、選擇性篩選
  

• 早期非臨床安全性和有效性

b. “非臨床研究”

• 系統的CMC研究

• 整套藥代動力學
• ADME：Absorption吸收, Distribution分布, 
              Metabolism代謝，Excretion排泄



• 分析方法：
• 吸收&PK：血時曲線以及生物利用度
• 分布：全血分配、血漿蛋白結合和組織分布
• 代謝：體外代謝穩定性以及體內外樣本代謝產物鑒定（生物轉化）
• 排泄：糞便/尿液/膽汁回收率檢測（物質平衡）
• 藥物相互作用：PhaseI/II代謝酶以及轉運體等
• 開展階段：
• 首次IND遞交階段，全套ADME數據、包括方法驗證、藥物藥物相互作用
• 臨床試驗期間：臨床試驗藥代動力學、物質平衡、藥物藥物相互作用
• 指導原則：（指導原則僅為建議。需根據每個項目的具體情況總合評估需要開展哪些研究）
• NMPA
• 藥物非臨床藥代動力學研究技術指導原則（2014）
• 藥物相互作用研究技術指導原則（2021）
• ICH
• S3A
• S3B
• FDA
  EMA
  中美差異：NMPA單保或與FDA雙報需遵循NMPA原則，僅FDA申請可以簡化；
  
  
• 若生物分析方法需要用于PK數據檢測，則需遵從GLP
• 對于進口藥物，結合境外已有的臨床數據確定是否需要增補相關實驗；
• 組織分布和排泄試驗信息可在QWBA（整體自顯影定量）試驗中獲得、臨床試驗間開展。FDA不要求的數據最好提前做好。
  
  
• 研究要求
• 分析方法驗證（NMPA）
• 生物基質
• 2種藥代動物血液（全血/血漿/血清等）
• 1種代表性組織（組織分布試驗）
• 糞便/尿液/膽汁（排泄試驗）
• 驗證內容（針對非臨床的藥代動力學non-GLP，針對PK檢測需要GLP）
• 特異性
• 標準曲線與定量范圍
• 精密度與準確度
• 定量下限
• 樣品穩定性
• 提取回收率
• 稀釋可靠性
• 殘留等
• 吸收&PK
• 種屬選擇
• 在考慮與人體藥代動力學性質相關性的前提下（體外體系MetID），盡可能選擇與毒理學和藥效學研究相同的動物
• 兩種或兩種以上種屬（嚙齒&非嚙齒）；雌雄各半；
• 劑量選擇
• 低劑量：與動物最低有效劑量基本一致
• 中、高：按一定比例增加（通常2-4倍）
• 給藥途徑選擇：應盡可能與臨床用藥一致
• 給藥頻率選擇
• 單次給藥
• 多次給藥：選用一個劑量（多為有效劑量），通常連續給藥7天
• 采樣：整個采樣時間應持續到3-5個半衰期，或持續到血藥濃度為Cmax的1/10-1/20；
• 數據解讀：
• 血管外給藥關注生物利用度，體內動力學過程是屬于線性還是非線性；雌雄差異；蓄積情況；和TK試驗結果對比。
• IND階段可不開展動物食物影響研究，其對人體食物影響預測有一定局限性，臨床階段建議盡早開展人體食物影響研究，通常建議在臨床II期前完成，可在II期和III期實驗設計中提供給藥方式依據。
• 體外滲透
• Caco-2或MDCK細胞，建議用Caco-2，（因為該細胞表達P-gp和BCRP外排轉運體，可以初步評估轉運體底物相關信息）
• 測試濃度：至少3個，結合預計臨床給藥劑量
• 數據解讀：
• IND階段不強制要求，建議做
• 獲得滲透性數據，結合溶解度相關信息，初步判斷API的BCS分類，為藥學研究和制劑研究提供數據
• 分布
• 血漿蛋白結合
• 種屬選擇：人、藥效/藥代/毒理實驗種屬
• 濃度選擇：3個濃度（包括有效濃度）
• 數據解讀：濃度依賴性和種屬差異
  
• 組織分布
• 種屬選擇：通常選用大鼠或小鼠，抗腫瘤也可選擇荷瘤動物
• 劑量選擇：一般一個有效劑量即可
• 組織選擇：心、肝、脾、肺、腎、胃腸道、生殖腺、腦、體脂、骨骼肌等，可根據毒性靶器官增加；
  
• 采樣：至少3個時間（吸收相、平衡相和消除想），每個時間點至少6只動物，且雌雄個半數據；
• 數據解讀：關注藥效靶組織或毒性靶組織的分布情況
• 全血分配系數：IND階段不強制要求，確定血漿PK是否有代表性，可選擇全血，同時可以提供血液毒性相關信息
• 代謝
• 體外代謝穩定性&代謝產物鑒定
• 種屬選擇：人、嚙齒類動物及非嚙齒類動物
• 體系選擇：肝細胞、微粒體以及血漿等，根據化合物代謝特性選擇有代表性的體系
• 濃度：單濃度
• 數據解讀：評估動物與人代謝的種屬差異性，尤其代謝產物類型及產物量的差異，作為種屬選擇依據，選擇跟人較接近的嚙齒類與非嚙齒類各一個
• 體內樣本代謝產物鑒定
• 基質：血漿和排泄樣品
• 樣品選擇：建議高劑量組，不同時間點混合樣品（Hamilton法）
• 數據解讀：確定體內物質基礎以及生物轉化情況
• 特別關注
• 如果個別產物量過高，建議鑒定產物結構合成相應的標準品，在PK以及TK試驗中進行相應的檢測 
• 臨床盡早開展人體內代謝產物研究，進一步評估毒理學實驗種屬選擇合理性。確定人體中是否有人特有代謝產物或高比例代謝產物。通常在首次人體實驗FIH期間完成
• 根據產品在人體內的代謝特性（主要通過肝臟代謝后清除）確定是否開展肝功能損傷者的特殊人群PK。
• 排泄
• 建議同時提供嚙齒類與非嚙齒類動物，但通常僅非嚙齒類也可，雌雄各半（每個性別3只）
• 劑量選擇：一個有效劑量即可
• 采樣：按一定時間間隔分段收集尿糞樣品，直至樣品中檢測物低于定量下限或小于給藥量的1%
• 膽管插管引流，已合適的時間間隔收集膽汁（一般為48-72h）
• 數據解讀：計算藥物及主要代謝產物自糞、尿、膽汁排除速度及總排出量（占總給藥量的百分比），提供物質平衡的數據。
• 回收率低：目前IND階段CDE對于回收率沒有具體限度要求，建議同時提供排泄樣本的產物定性分析結果作為補充依據。
• 回收率低時，臨床試驗期間盡早開展物質平衡研究，必要時采用同位素放射性標記，通常在臨床III期之前完成。若計劃采用人體放射性標記實驗，則需盡早開展動物定量整體放射性自顯影QWBA，并提供數據。
• 根據產品人體排泄特性（主要通過腎臟排泄）需確定是否開展腎功能損傷人群的PK，
• 酶DDI
• 代謝表型（CYP/UGT ID）
• CYP/UGT抑制
• CYP誘導
• IND階段建議至少評價CYP ID，CYP可逆抑制，CYP誘導，CYP TDI以及二相代謝酶如UGT相關體外研究可臨床試驗期間平行開展
  
• 轉運體 DDI
• 外排轉運體：P-gp/BCRP
• 內吞轉運體：
  OATP1B1/OATP1B3/OAT1/OAT3/MATE1/MATE2-K/OCT1/OCT2
• IND階段建議評價P-gp/BCRP/OATP1B1抑制，其底物涉及他汀類底物或治療窗比較窄的常用藥（地高辛）
• 其他轉運體相關體內外DDI可以根據產品適應癥常見的合并用藥情況以及人體ADME特性綜合評估必要性以及開展時機，最晚NDA之前完成。
• 原料藥：API鹽型以及晶型盡量一致（藥效、藥代和毒理）
• 溶媒：溶媒盡量一致（藥效、藥代和毒理）
• 需要橋接實驗：
• 不同試驗用鹽型、晶型以及溶媒不一致
• 灌胃溶媒使用了特殊溶劑
• 臨床用制劑處方中添加了緩控釋相關輔料
• 臨床用制劑API進行了微粉化，而非臨床試驗API未進行微粉化
• 臨床試驗期間發生藥學變更
  
• 非臨床藥效學
• PD所涉及實驗：
• 主要Primary藥效學：體外&體內
• 體外：
• 結合活性
• 選擇性
• 證明作用機制和效果的生化實驗活細胞實驗
  
• 體內：驗證化合物的有效性，確定最小起效劑量
• 動物模型
• 證明對靶點或疾病的影響
• PK-PD：
  
• 次要secondary藥效學：


使用多少個動物模型，并未有具體的指南規定，中美申報至少2-3個動物模型。若盡在美國申報，一個動物模型也可。

對于抗腫瘤藥物，動物模型沒有要求與臨床評價瘤種一致。
聯合用藥的藥效學實驗：
    -全新靶點和機制或所聯合藥物無臨床數據的藥物：受試化合物需要有非臨床藥效學作為理論基礎；
    -所聯合藥物有同靶點同機制的藥物有臨床數據作為理論依據


• GLP毒理驗證安全性

• 一般毒理學

• 單次給藥毒性試驗（若在其他毒性試驗中可證明時，可不開展;通常DRF實驗可獲得）

• DRF（不要求遵循GLP）包括：MTD+14天重復劑量毒性預試驗

• 重復劑量毒性試驗：恢復期+伴隨毒代動力學

• MTD
  





• 給藥途徑：與臨床擬用給藥途徑相同

• 樣品要求：臨床批樣品不能低于毒理批樣品，雜質包括總雜單雜不能高于毒理批樣品
  

• 試驗動物：
  

• 種屬選擇：一個嚙齒動物一個非嚙齒動物（依據來源于藥代動力學研究，根據代謝譜代謝特征接近人類），雌雄各半

• 動物年齡：大鼠6-9周齡，猴子3-5歲

對于局部給藥的制劑，需要關注臨床擬用給藥途徑的長毒實驗并增加有系統暴露的長毒實驗。


特殊溶媒：不建議使用有特殊安全性考慮的溶媒比如β黃糊精。

代謝產物的安全性評價：


    -人體特有的代謝產物且暴露水平比較高

    -代謝產物暴露量超過總暴露量10%


• 安全藥理學：
• 樣本量：小動物每組一般不少于 10 只，大動物每組一般不少于 6 只。動物 一般雌雄各半。
  
• 嚙齒&非嚙齒：MTD或DRF
• 正式GLP實驗：short-term rodent&non-term RD tox 短期毒性實驗
• 體外hERG實驗
• 對于申報：（法規無明確規定要符合GLP，美國申報可非GLP；在中國申報，在境外有數據可非GLP；若首次開展臨床，最好GLP）
• 體內核心組合（Core Battery）試驗：(雌雄對半)
• 中樞神經系統（嚙齒類）
• 心血管系統（非嚙齒類）
• 呼吸系統（嚙齒類）
  
  

• 體內體外標準組合的遺傳毒

• 開展階段：

• 首次進入臨床的化合物（first in human FIH）:兩個體外實驗可支持申請

• Ames可支持只是單次給藥的臨床試驗

• PhaseII開展前要完成體外+體內標準組合

• 抗腫瘤藥：申請初始IND時不必須，在NDA時是必須的。
  
• 體外：
  
• 細菌回復突變試驗Ames
• 體外染色體畸變試驗
• 小鼠淋巴瘤細胞TK基因突變試驗（MLA）
• 體外微核試驗
• 體內：
  
• 體內微核試驗
• 體內彗星試驗
  其他體內試驗

• 標準組合實驗：

• 2*體外實驗+1*體內實驗：（常用）

• Ames+染色體畸變/MLA/體外微核+體內微核試驗

• 1*體外實驗+2*體內實驗：

• Ames+體內微核試驗+體內彗星試驗

• 發育與生殖毒性

• （I段）生育力與早期胚胎發育

• 動物種屬：大鼠

• 目的：評價受試物對動物生殖毒性或干擾作用

• （II段）胚胎-胎仔發育

• 動物種屬：大鼠、兔

• 目的：評價對妊娠、胚胎及胎仔發育影響

• （III段）圍產期

• 動物種屬：大鼠

• 評價受試物對妊娠/哺乳動物及胚胎和自帶發育的影響，持續到子代性成熟

• 開展時間：

• 新藥IND申請時可不開展生殖毒性實驗
  

• 進入II期臨床時，需完成II段生殖毒性的預實驗，可用于支持最長研究周期為3個月、最多入組150名育齡女性的臨床研究

• 正式進入III期臨床前，需要完成I段生殖毒性和兩種動物種屬的II段生殖毒性正式實驗

• NDA前完成圍產期毒性試驗

• 正式實驗都遵循GLP

• 對于抗腫瘤藥：上市前完成II段兩個種屬的胚胎-胎仔毒性的正式即可

• 致癌性

• 需要開展：

• 臨床給藥時程≥6個月

• 治療慢性復發性疾病而需要間歇使用

• 遺傳毒性結果毒性

• 已知該類化合物具有潛在致癌性

• 實驗設計

• 給藥周期：1.5-2年（因試驗周期較長，需提前3年規劃實驗）

• 動物種屬：小鼠、大鼠

• 試驗指標：臨床觀察、組織病理學、重點觀察各組織腫瘤的發生情況

• 預留時間：建議預留3年

• 抗癌藥不需要進行致癌性試驗，但當抗癌藥物較為有效并能明顯延長生命的情況下，應考慮有關繼發性腫瘤問題

• 其他毒性試驗

• 刺激性

• 適用于經皮膚、黏膜、腔道、血管等非口服途徑給藥

• 檢查皮膚刺激、血管刺激、黏膜刺激

• 給藥途徑：臨床擬用給藥途徑相同

• 可在做一般毒性-長毒時觀察，但需要單獨出報告

• 化合物樣品：需使用制劑
  

• 溶血性

• 適用非口服給藥的如注射劑和可能引起免疫性溶血或非免疫性溶血反應的局部給藥制劑。

• 試驗方法：

• 體外

• 體內：視情況而定，不必要
  

• 光毒性

• 不區分是否為抗腫瘤藥物都需要檢測

• 新藥初始IND申請時，需要檢測光化學性質來評判是否有光毒性、組織分布

• 化合物在可見光290-700nm波長范圍內，化合物的摩爾系數MAC是否大于1000，<1000時，則認為化合物無足夠光吸收信區，無光毒性；>1000結合非臨床藥代動力學組織分布，觀察皮膚等組織是否有相關分布，如果有，則需要再申請臨床的方案設計一些措施來避免受試者收到光毒性潛在可能。

• 也可在臨床試驗進行中持續評估是否有光毒性

• 臨床證據權重>非臨床

• 藥物依賴性：

• 主要針對中樞神經系統的藥物、止咳藥、止疼藥等

• 可根據早期臨床數據判斷

• III期臨床前開展，

• 嚙齒類

• 藥物辨別實驗、自身給藥實驗、戒斷實驗

• 免疫毒性

• 基于證據權重評估是否進行附加的免疫毒性試驗

• 若需要，則應在III期臨床前完成。

• 改良型新藥-化藥2類-必須要有臨床優勢

• 1. 抑制活性成分的光學異構體，或對已知活性成分成酯成鹽等

• 進行藥學對比，物理化學性質是否發生改變？

• 是否產生新的雜質、降解產物？

• 是否使用新型輔料？

• 2. 含有已知活性成分的新劑型、新處方工藝、新給藥途徑

• 改變給藥途徑或制劑處方，推薦進行單次給藥毒性和/或重復給藥毒性

• 若已有的全身毒性信息不足以支持新制劑處方/新給藥途徑的暴漏情況，或者全身暴露模式發生性改變，應提供附加的毒性試驗，如安全藥理學試驗、生殖毒性試驗等，長期使用的藥物可能還需要考慮進行致癌性試驗（具體問題具體分析）

• 3. 含有已知活性成份的新復方制劑

• 給組分已有的非臨床數據是否足以支持復方制劑的臨床用藥安全（包括給藥劑量、給藥方案、持續時間、預期臨床暴露水平等）

• 4. 含有已知活性成分的新適應癥制劑

• 對藥物的藥理作用機制研究

• 非臨床藥效學研究

• 非臨床安全性評價，需要分析已有的非臨床/臨床安全性信息，判斷是否支持新的適應癥（用法用量、給藥周期、給藥途徑、給藥人群等），如用法用量明顯增加？給藥周期明顯延長？（具體問題具體分析，暴露量是否超過之前的暴露量，未超過可不用重新非臨床安全性評價）

c. “初始IND申報”

• CMC藥學研究資料
  

• 非臨床實驗報告
  

• 初始CTD、IB和臨床試驗方案

• 中美IND申報-非臨床藥理毒理關注點

• 技術指南：ICH指導原則

• GLP：

• 中國IND申報：遵從NMPA《藥物非臨床研究質量管理規范》（2017年9月1日）

• 美國IND申報：遵從FDA GLP（21CFR Part 58）,或遵從OECD良好實驗室規范準則決議[C(97))186/Final]

• 中國GLP的非臨床研究或臨床I期、II期，是否支持美國FDA申報？

• 申辦方要求CRO安評機構出具中美GLP對比，對比SOP、條例等，結論說明實驗操作規范結果可信等情況

• 申報美國IND時需準備SEND Datasets數據包

• 包括：單次給藥毒性、重復劑量毒性、安全藥理和致癌性

• 申報FDA商業IND，對于2017年12月后進行的毒理學需要完整數據包

• FDA商業IND，對于2017年12月前進行的毒理學需要至少有simplified簡要數據包（不包含安全藥理）
  

d. “完成IND申報，得到默示許可，開展臨床I期、II期”

• 完善CMC研究
  

• 完善藥代動力學

• 不同給藥周期要求的GLP毒理

• 各個階段的長毒實驗（medium-term rodent&non-term RD tox）

• 生殖毒性的I段實驗，兩個種屬的II段實驗,
  

• 基礎資料按時更新：CTD資料、IB研究者手冊、研究期間安全性更新報告

e. “III期到NDA”

• 繼續完善毒理

• 符合新藥上市要求的長毒實驗

• II段的生殖毒性實驗

• 有必要的話開展致癌性實驗

f. “新藥上市申請NDA”